菌体浓度是指单位体积(如毫升、升等)内菌体的质量。发酵过程中,菌体数量会逐渐增加,因此需要测定菌体浓度以控制发酵过程。
重量法是一种常用的检测菌体浓度的方法,其步骤如下:
1. 取一定量的发酵液(如 100 毫升),并记录其重量。
2. 将发酵液放入离心管中,在离心机中离心(通常为 3000-5000 转/分钟,离心 10-20 分钟),使菌体沉淀到离心管底部。
3. 将上清液倒掉,用无菌纸巾吸去离心管的余液,使离心管中仅剩下菌体沉淀。
4. 将离心管静置一段时间(如 10 分钟),使沉淀的菌体尽量凝结成一体,然后用无菌纸巾吸去底部的余液。
5. 将离心管称重,并记录下重量。
6. 计算菌体质量,即菌体质量 = 离心管中的总重量 - 空离心管的重量。
7. 计算菌体浓度,即菌体浓度 = 菌体质量 / 发酵液的体积。例如,若发酵液中的菌体质量为 0.5 克,发酵液体积为 100 毫升,则菌体浓度为 0.5 克 / 100 毫升 = 5 克/升。
需要注意的是,该方法最好在无菌条件下操作,以避免外界杂菌的污染。同时,由于不同的菌种会有不同的沉淀速度和凝聚性,因此在在选择离心参数和静置时间时需要根据菌种的特性进行调整。